欧美疯狂性受xxxxx另类_专干老肥熟女视频网站_国产无遮挡吃胸膜奶免费看_国产农村乱辈无码_女邻居的大乳中文字幕

提供商:         上海研謹生物
服務(wù)名稱:       蛋白雙向2D-WB電泳實驗服務(wù)
規(guī)格:           實驗服務(wù)
價格：          500元
收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。
更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
蛋白雙向2D-WB 電泳實驗服務(wù)
 
 
實驗技術(shù)簡介
2D-WB是雙向電泳與傳統(tǒng)western blot結(jié)合而成的一項技術(shù)。一般實驗流程 為抗原蛋白混合物先經(jīng)雙向電泳分離,然后將凝膠蛋白轉(zhuǎn)印至支持膜上，再通過抗體雜交顯色。2D-WB技術(shù)可以檢測到抗原等電點或分子量發(fā)生的微小變化，在蛋白翻譯后修飾的研究中有很好的應(yīng)用;而2D-WB結(jié)合質(zhì)譜鑒定技術(shù)，可以從蛋白混合物中找到免疫原性更強的抗原。
2D Westerm blot概述
2D-WB是雙向電泳與傳統(tǒng)western blot結(jié)合而成的一項技術(shù)。一般實驗流程 為抗原蛋白混合物先經(jīng)雙向電泳分離，然后將凝膠蛋白轉(zhuǎn)印至支持膜上，再通過抗體雜交顯色。2D-WB技術(shù)可以檢測到抗原等電點或分子量發(fā)生的微小變化，在蛋白翻譯后修飾的研究中有很好的應(yīng)用;而2D-WB結(jié)合質(zhì)譜鑒定技術(shù)，可以從蛋白混合物中找到免疫原性更強的抗原。
2D Western blot技術(shù)服務(wù)內(nèi)容
1、蛋白質(zhì)抽提與定量;
2、雙向電泳;
3、轉(zhuǎn)膜，封閉，孵育,顯示成像。
實驗操作流程
1、第--項電泳(IEF) ,膠條平衡，第二項電泳SDS-APGE.
2、第二項電泳結(jié)束后，取出凝膠進行轉(zhuǎn)膜，轉(zhuǎn)膜方法可選擇濕法轉(zhuǎn)移和半干法轉(zhuǎn)移。常用的膜是NC膜和PVDF膜。
3、封閉，5%脫脂奶粉或5% BSA封閉1小時(室溫)或過夜(4度)。
4、一抗孵育,根據(jù)抗體說明書選擇孵育時間，常規(guī)的孵育條件是室溫1小時或4度過夜，一抗孵育后取出膜
TBST洗滌3次，每次5分鐘。
5、二抗孵育:根據(jù)一抗選擇合適的二抗(抗鼠、抗人、抗兔等)，室溫孵育1小時后取出膜TBST洗滌3次,每次5分鐘。
6、顯影:將A、B底物按比例稀釋混臺均勻后滴在膜上，暗室中將膠片置于膜上,蓋上壓片夾,曝光一定時間后將膠片放入顯影液中進行顯影，直到出現(xiàn)清晰的蛋白質(zhì)條帶，清水漂洗一下后在定影液中定影， 曝光時間需綜臺考慮蛋白質(zhì)的上樣量，抗體稀釋濃度，抗體孵育時間等因素。
7、定影后，清洗膠片，晾干，標定marker,掃描圖片和2D Western blot圖片分析。
送樣須知，為了保證2D Western blot技術(shù)服務(wù)能順利進行,樣品寄送需滿足以下要求:
1、顧客提供:組織、細胞、蛋白質(zhì)溶液等; 一抗(可交由研謹公司代購)。
2、運輸要求:干冰或液氮包裝寄送。
注:樣本應(yīng)避免各類污染和反復(fù)凍融。
2D Western blot技術(shù)服務(wù)報告內(nèi)容
1、蛋白質(zhì)定量結(jié)果及電泳上樣量;
2、原始膠片、電子圖片及圖片分析結(jié)果;
3、2D Western blot完整的實驗報告，包括實驗步驟、使用儀器和試劑等。
附: 2D Western blot實驗步驟
1、2D Western blot蛋白質(zhì)樣本制備,制備的主要原則是盡可能溶解全部蛋白質(zhì)，破壞蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間的相互作用，避免各類干擾物質(zhì)，樣品制備與IEF兼容等。
2、雙向電泳的主要步驟，第-項電(IEF) ，膠條平衡，第二項電泳SDS-APGE.
3、第二項電泳結(jié)束后，取出凝膠進行轉(zhuǎn)膜，轉(zhuǎn)膜方法可選擇濕法轉(zhuǎn)移和半干法轉(zhuǎn)移。常用的膜是NC膜和PVDF膜。
4、封閉， 5%脫脂奶粉或5% BSA封閉1小時(室溫)或過夜(4度)。
5、-抗孵育,根據(jù)抗體說明書選擇孵育時間，常規(guī)的孵育條件是室溫1小時或4度過夜，一 抗孵育后取出膜TBST洗滌3次，每次5分鐘。
6、二抗孵育:根據(jù)-抗選擇合適的二抗(抗鼠、抗人抗兔等)， 室溫孵育1小時后取出膜TBST洗滌3次，每次5分鐘。
7、顯影:將A、B底物按比例稀釋混合均勻后滴在膜上,暗室中將膠片置于膜上，蓋上壓片夾，曝光一定時間后將膠片放入顯影液中進行顯影，直到出現(xiàn)清晰的蛋白質(zhì)條帶，清水漂洗一下后在定影液中定影， 曝光時間需綜合考慮蛋白質(zhì)的.上樣量，抗體稀釋濃度，抗體孵育時間等因素。
8、定影后，清洗膠片，晾干，標定marker,掃描圖片和2D Western blot圖片分析。
 

從2011年開始我們致力于在生命科學領(lǐng)域、生物醫(yī)學實驗外包及論文潤色服務(wù)，協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯(lián)系。
實驗代做：

Elisa免費代做	Wb代做	蛋白芯片定制	石蠟冰凍切片
HE染色	透射電鏡	掃描電鏡服務(wù)	免疫共沉淀
流式細胞分選	CCK8檢測代做	組織芯片微陣列	免疫細胞化學ICC
熒光染料標記	油紅O染色	免疫熒光染色	免疫共沉淀（Co-IP）實驗
熒光定量PCR	探針合成	酪蛋白酶譜MMP	免疫組化IHC
激光共聚焦	蛋白雙向	蛋白相互作用	課題協(xié)助外包
CBA流式多因子	瓊脂糖凝膠電泳	疾病模型	藥理毒理